不同類(lèi)型的凝血儀采用的原理也不同,目前主要采用的檢測(cè)方法有:血凝分析儀工作原理凝固法、底物顯色法、免疫法、乳膠凝集法等 [1] 。
凝固法(生物物理法)
凝固法是通過(guò)檢測(cè)血漿在凝血激活劑作用下的一系列物理量(光、電、機(jī)械運(yùn)動(dòng)等)的變化,再由計(jì)算機(jī)分析所得數(shù)據(jù)并將之換算成最終結(jié)果,所以也可將其稱(chēng)作生物物理法。
2. 底物顯色法(生物化學(xué)法)
底物顯色法是通過(guò)測(cè)定產(chǎn)色底物的吸光度變化來(lái)推測(cè)所測(cè)物質(zhì)的含量和活性的,該方法又可稱(chēng)為生物化學(xué)法。其原理是通過(guò)人工合成與天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列順序、并含有特定作用位點(diǎn)的小肽,并將可水解產(chǎn)色的化學(xué)基因與作用位點(diǎn)的氨基酸相連。測(cè)定時(shí)由于凝血因子具有蛋白水解酶的活性,它不僅能作用于天然蛋白質(zhì)肽鏈,也能作用于人工合成的肽鏈底物,從而釋放出產(chǎn)色基因,使溶液呈色。血凝分析儀工作原理產(chǎn)生顏色的深淺與凝血因子活性成比例關(guān)系,故可進(jìn)行精確的定量。目前人工合成的多肽底物有幾十種,而最常用的是對(duì)硝基苯胺(PNA),呈黃色,可用405mm波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定。
3.免疫比濁法:利用抗原與抗體之間特異性結(jié)合的特點(diǎn),使待測(cè)物與標(biāo)記有其特異性抗體的微粒結(jié)合,使得反應(yīng)體系的濁度發(fā)生變化,通過(guò)檢測(cè)其光強(qiáng)度的變化定量待測(cè)物的方法。
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